|
|
Protein profiling, metabolic enzymes and transmembrane signaling in the heart of spontaneously hypertensive SHR-Tg19 rat
Manakov, Dmitry ; Novotný, Jiří (vedoucí práce) ; Kuncová, Jitka (oponent) ; Kalous, Martin (oponent)
Kardiovaskulární nemoci jsou nejčastější příčinou smrti jak na celém světě, tak v České republice. Hlavní faktory přispívající k rozvoji srdečních onemocnění, kromě věku a pohlaví, jsou obezita, vysoký krevní tlak a vysoká hladina cholesterolu a triglyceridů v krvi. Spontánně hypertenzní potkan (SHR) byl vyvinut a používán k vyhledávání genetických determinant těchto projevů. Tento běžně používaný potkaní model rozvíjí hypertenzi, dyslipidemii a inzulínovou rezistenci díky abnormálnímu genu translokázy mastných kyselin Cd36. Předchozí studie ukázaly, že transgenní oprava Cd36 u kmene SHR-Tg19 zlepšuje činnost beta-adrenergního systému v srdci, mírně zvyšuje srdeční hmotnost a vede ke zvýšení náchylnosti k arytmiím. Tato práce měla dva hlavní cíle: 1) Zjistit, zda a jak transgenní náhrada Cd36 v SHR ovlivňuje proteinové složení, mitochondriální funkci a aktivitu vybraných metabolických enzymů srdce. 2) Studovat expresi a distribuci vybraných složek beta-adrenergního signálního systému v lipidových raftech izolovaných pomocí solubilizace membrán detergentem TX-100. Rozhodli jsme se porovnat dva běžně používané proteomické přístupů, 2D elektroforézu spojenou s MALDI-TOF hmotnostní spektrometrií a tzv. label-free LC-MS. Výsledky neukázaly překryv mezi odlišně exprimovanými proteiny identifikovanými...
|
|
|
Protein profiling, metabolic enzymes and transmembrane signaling in the heart of spontaneously hypertensive SHR-Tg19 rat
Manakov, Dmitry ; Novotný, Jiří (vedoucí práce) ; Kuncová, Jitka (oponent) ; Kalous, Martin (oponent)
Kardiovaskulární nemoci jsou nejčastější příčinou smrti jak na celém světě, tak v České republice. Hlavní faktory přispívající k rozvoji srdečních onemocnění, kromě věku a pohlaví, jsou obezita, vysoký krevní tlak a vysoká hladina cholesterolu a triglyceridů v krvi. Spontánně hypertenzní potkan (SHR) byl vyvinut a používán k vyhledávání genetických determinant těchto projevů. Tento běžně používaný potkaní model rozvíjí hypertenzi, dyslipidemii a inzulínovou rezistenci díky abnormálnímu genu translokázy mastných kyselin Cd36. Předchozí studie ukázaly, že transgenní oprava Cd36 u kmene SHR-Tg19 zlepšuje činnost beta-adrenergního systému v srdci, mírně zvyšuje srdeční hmotnost a vede ke zvýšení náchylnosti k arytmiím. Tato práce měla dva hlavní cíle: 1) Zjistit, zda a jak transgenní náhrada Cd36 v SHR ovlivňuje proteinové složení, mitochondriální funkci a aktivitu vybraných metabolických enzymů srdce. 2) Studovat expresi a distribuci vybraných složek beta-adrenergního signálního systému v lipidových raftech izolovaných pomocí solubilizace membrán detergentem TX-100. Rozhodli jsme se porovnat dva běžně používané proteomické přístupů, 2D elektroforézu spojenou s MALDI-TOF hmotnostní spektrometrií a tzv. label-free LC-MS. Výsledky neukázaly překryv mezi odlišně exprimovanými proteiny identifikovanými...
|
|
|
A study of beta-adrenergic myocardial signaling in spontaneously hypertensive rat of transgenic strain SHR-Tg19
Manakov, Dmitry ; Novotný, Jiří (vedoucí práce) ; Nováková, Olga (oponent)
β-adrenergní signalizace hraje důležitou roli v srdci, kde reguluje srdeční frekvence a kontraktilitu. Má určitý vliv na rozvoj hypertenze a srdeční hypertrofií. Jako model pro lidské esenciální hypertenze často se používá spontánne hypertenzní potkan (SHR), i když primární původ její rozvoje v tomto kmenů zůstává dočasně neznámý. Dysfunkce v oblasti regulace translokázy mastných kyselin Cd36 byla předpokládaná jednou z příčin rozvojů hypertenze u SHR. Transgenní kmen SHR-Tg19 (imenovany také SHR-Cd36) byl získán pro studium hypertenze u SHR, a má divoký typ genů FAT/Cd36. Tato práce je zaměřena na zkoumání β-adrenergní signalizace v srdci spontánně hypertenzního potkana transgenniho kmene SHR-Tg19 v porovnání s SHR jako kontrolou. Exprese a distribuce β1- a β2-AR byly měřeny pomocí radioaktivně značenych ligandu a Western immunoblotu, pomoci kterého také byli měřený exprese G proteinů a adenylyl cyclazy. Také byli pozorovány změny aktivity cyclazy pod vlivem stimulačních ligandu. Výsledky ukázaly žádný significancni změnu v exprese β1-AR v obou komorah, ačkoli saturační vazebně pokusy ukázali signifikantní zvycheni v β-AR distribuce, osobně pro β2-AR. Žádný změny v exprese podjednotek Gsα a Giα nebyli pozorovány. Spolu s tím byla prokázána zvýšená exprese β2-AR v LV. Aktivita AC stimulována...
|
|
|
Úloha transportéru FAT/CD36 v patofyziologii srdce
Kovalčíková, Jana ; Nováková, Olga (vedoucí práce) ; Wasková, Petra (oponent)
1. Abstrakt FAT/CD36 je 88 kDa glykoprotein, který hraje klí ovou roli v transportu mastných kyselin s dlouhým et zcem (LCFA) p es plazmatickou membránu zejména v srdci, kosterním svalu a tukové tkáni. Ú astní se transportu mastných kyselin (FA) s dalšími membránovými proteiny, kterými jsou transportní protein mastných kyselin (FATP1-6), s plazmatickou membránou asociovaný protein (FABPpm) a cytosolický protein vázající mastné kyseliny (FABPc). V srde ní tkáni jsou, krom FAT/CD36, p ítomny jen FABPpm, FATP1 a 6 a srde ní typ FABPc ozna ovaný jako H-FABPc. Krom této možnosti transportu FA zprost edkovaného proteiny, probíhá transport FA také již d íve známou pasivní difúzí. Bun ná exprese FAT/CD36 je regulována jadernými receptory aktivovanými proliferátory peroxisom (PPAR), v srdci p edevším PPAR- . Neaktivní FAT/CD36 nalezneme v cytoplazmatických zásobách, zatímco aktivní FAT/CD36 je p ítomen na plazmatické membrán v lipidových raftech. Dv nejznám jší kaskády indukující translokaci FAT/CD36 z cytoplazmatických zásob do membrány, jsou inzulínová signální kaskáda, která zahrnuje aktivaci enzymu fosfatidyl-inositol-3-kinázy (PI3K), a kaskáda aktivovaná srde ní kontrakcí, která aktivuje adenosinmonofosfát kinázu (AMP kinázu). Dále m že být FAT/CD36 regulován ubikvitinací a hypoxií. FAT/CD36 p ispívá k...
|
|
| |
|
| |
host ::
RSS.